توضیحات
چکیده
در این تحقیق روش تخمیر در بستر جامد به منظور تولید آسپارژیناز توسط سویه جداسازی شده از جنس باسیلوس با استفاده از سبوس برنج انجام گردید.
بررسی اولیه با استفاده از طراحی Plackett-Burman نشان داد که از میان منابع کربن مورد آزمایش شامل: سبوس برنج، سبوس گندم، ساقه برنج، ساقه گندم ،سبوس برنج بهترین تأثیر را در افزایش تولید آنزیم واز میان منابع نیتروژن مورد آزمایش شامل: آسپاراژین، عصاره مخمر، پپتون ، تریپتون، آسپاراژین بهترین تأثیر در افزایش تولید آسپارژیناز را در بستر جامد نشان دادند(۰۵/۰>p). در مرحله بعدی بهینه سازی طی بررسی۴فاکتور سبوس برنج، آسپارژین، دمای انکوباسیون، زمان انکوباسیون در ۵ سطح بر تولید آسپارژینازبا بکار گیری روش RSM مقدار تولید آنزیم U/g24/69 حاصل شد. در بستر جامد میزان تولید آنزیم در مقایسه با بکارگیری طراحی آزمایش به روش Plackett-Burman و RSM 3 برابر حاصل شد. همچنین تحقیقات برای تعیین ویژگی های آنزیم آسپارژیناز تولید شده توسط سویه باکتریایی جداسازی شده انجام پذیرفت. حداکثر میزان تولید آنزیم تجربی بدست آمده در بستر جامد در میزان غلظت سبوس برنج۵/۱ درصد وزنی-وزنی، میزان غلظت آسپاراژین ۵/۰ درصد وزنی-وزنی، دمای ۳۰ درجه سانتی گراد، و مدت زمان ۷۲ ساعت بود.نتایج حاکی از اهمیت تولید آسپارژیناز در بستر جامد با استفاده از سوبسترای ضایعات سبوس برنج به دلیل قیمت ارزان و قابلیت دسترسی فراوان و پتانسیل بالا در تولید آنزیم است.
کلمات کلیدی: بهینه سازی، ضایعات سبوس برنج، تخمیر در بستر جامد
فهرست مطالب
۱-۴- تعریف اصطلاحات و واژگان تحقیق۴
۱-۴-۱- آنزیم ها و ساختار آن ها.. ۴
۱-۴-۲- مکانیسم عمل آنزیم ها.. ۵
۱-۴-۳- عوامل موثر بر فعالیت آنزیم ها.. ۶
۱-۴-۵- آنزیم های میکروبی و انواع آن ها.. ۹
۱-۴-۶- معرفی آنزیم ال-آسپارژیناز.. ۱۰
۱-۴-۷- منابع تولید آنزیم ال آسپارژیناز.. ۱۱
۱-۴-۸- مکانیسم عمل و ساختار آنزیم ال آسپارژیناز.. ۱۳
۱-۴-۹- خاک و میکروفلور آن.. ۱۵
۱-۴-۱۰- تخمیر در بستر جامد.. ۱۶
۱-۴-۱۰-۱- سوبستراهای مورد استفاده برای تولید آنزیم در بستر جامد 17
فصل دوم:ادبیات و سوابق تحقیق۱۹
فصل سوم:مواد و روش های تحقیق۲۴
۳-۱- وسایل و تجهیزات به کار رفته در پژوهش۲۵
۳-۲- جداسازی باکتری های مولد ال- آسپارژیناز از خاک۲۷
۳-۲-۱- مواد و محیط کشت های مورد استفاده برای جداسازی.. ۲۷
۳-۳- شناسایی گونه های مولد آنزیم۲۸
۳-۳-۲-۱- مراحل کلی شناسایی مولکولی……………………………………………………………………………………..۲۹
۳-۳-۲- بهینه سازی واکنش PCR……………………………………………………………………………………………….29
۳-۳-۳- انجام واکنش PCR بر روی نمونه های DNA ژنومی………………………………………………………۳۰
۳-۵- روش بهینه سازی و طراحی آزمایش۳۲
۳-۵-۱- طراحی آزمایش Plackett-Burman.. 32
۳-۵-۲- بهینه سازی آماری تولید آنزیم آسپاراژیناز به روش RSM 34
۳-۸- روش انجام ۱۲ آزمایش Burman- Plackett:38
۳-۸-۱- مواد تشکیل دهنده محلول نمکی:.. ۳۸
۳-۹- رسم منحنی استاندارد آمونیاک۳۹
۳-۱۰- تهیه ی معرف های سنجش فعالیت آنزیم۳۹
۳-۱۱- نحوه ی سنجش فعالیت آنزیم ۱۲آزمایش۴۰
۳-۱۱-۱- تخمیر در بستر جامد طی بهینه سازی تولید با روش RSM: 41
۳-۱۱-۲- اثر پارامترهای مختلف بر تولید آنزیم در بستر جامد.. ۴۱
۳-۱۱-۴- سنجش فعالیت آنزیم.. ۴۲
۳-۱۳- اندازه گیری فعالیت آسپارژیناز از نظر کمی۴۳
۴-۲- شناسایی گونه های مولد آنزیم۴۵
۴-۲-۱- شناسایی مولکولی……………………………………………………………………………………..۴۶
۴-۳- اندازه گیری فعالیت آسپاراژیناز از نظر کمی۴۸
۴-۵- طراحیآزمایشوبهینه سازیفرآیندبهروشسطحپاسخ۵۰
۴-۵-۲- بهینه سازی آماری تولید آسپاراژیناز در بستر جامد.. ۵۱
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.